BMP蛋白通路检测与Noggin蛋白活性检测
- 靶点和信号背景。
2. BMP报告基因检测（BRE-Luc Reporter Gene Assay）的原理和应用
2.1 检测原理：Id1启动子序列是BMP信号通路的下游响应元件。报告基因质粒是将Smad结合元件Id1启动子序列装在荧光素酶启动子位置。一旦BMP-Smad通路被激活，报告基因就会表达荧光素酶，通过检测荧光素酶的水平，可以高灵敏度地评价BMP通路的激活水平。
2.2. 检测BMP通路水平
本检测是构建稳定转染报告基因的细胞系，评价药物对BMP依赖的Id1转录激活的抑制作用。加入BMP能够诱导Id1的转录激活作用，细胞中萤火虫萤光素酶的水平就会提高。而该报告基因细胞并不会对TGF-β有交叉反应。 该检测可以用于BMP通路激动剂或者拮抗剂药物的开发。（图2）
图2. BMP2特异性激活BRE报告基因
2.3. 类器官培养核心蛋白Noggin的活性检测质控
Noggin是类器官培养过程中添加的一种核心蛋白。 Noggin与骨形态发生蛋白结合可以协调 Wnt信号激活干细胞，促进其增殖，被广泛应用于各种类器官的长期培养，如肝脏类器官、小肠类器官及输卵管类器官。Noggin其作为转化生长因子（TGF）β超家族成员的细胞外负调节因子，可通过形成Noggin-BMP复合体特异性阻断BMP分子与其受体，包括II型受体（BMPR2、ActRIIa和ActRIIb）和I型受体（Alk1、Alk2、Alk3和Alk6）的结合，从而阻断BMP通路效应，调控细胞存活，增殖和分化[6]。加入Noggin能抑制BMP诱导的Id1转录激活作用。
本检测是构建稳定转染BMP通路检测工具，不仅可以用于BMP通路药物研发和评价，也被用于Noggin蛋白的质控测试。（图3）
图3. Noggin 拮抗BMP通路的激活
相关产品：
| 名称 | 货号 | 规格 | 价格(人民币) |
|---|---|---|---|
| Recombinant Human Noggin Fc Chimera Protein | K2P-NG01-100ug | 100ug | 2000元 |
| K2P-NG01-1mg | 1mg | 9000元 |
参考文献：
- Rasheed, N., et al., Atm-deficient mice: an osteoporosis model with defective osteoblast differentiation and increased osteoclastogenesis.Hum Mol Genet, 2006. 15(12): p. 1938-48.
- Kuilman, T., et al., Oncogene-induced senescence relayed by an interleukin-dependent inflammatory network.Cell, 2008. 133(6): p. 1019-31.
- Wang, R.N., et al., Bone Morphogenetic Protein (BMP) signaling in development and human diseases.Genes Dis, 2014. 1(1): p. 87-105.
- Ehata, S. and K. Miyazono, Bone Morphogenetic Protein Signaling in Cancer; Some Topics in the Recent 10 Years.Front Cell Dev Biol, 2022. 10: p. 883523.
- Todd, G.M., et al., Secreted BMP antagonists and their role in cancer and bone metastases.Bone, 2020. 137: p. 115455.
- Kang, H.W., R. Walvick, and A. Bogdanov, Jr., In vitro and In vivo imaging of antivasculogenesis induced by Noggin protein expression in human venous endothelial cells.Faseb j, 2009. 23(12): p. 4126-34.
Please Select table
