科小途Q&A系列-肿瘤类器官模型有问必答（2）
在肿瘤类器官3D培养的过程中，或许您会有一系列的问题想要问。今天科途医学为大家整理了一些具有代表性的问题，由我们的技术小能手科小途进行解答：
Q1:实验操作中Matrigel胶为什么不凝固？
A1：Matrigel胶没有达到成胶浓度，是不会凝固成胶的。具体工作浓度和使用方法建议查看所使用的Matrigel胶说明书。
Q2：Matrigel胶在肿瘤细胞3D培养中的起到作用？
A2：Matrigel胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出的基底膜基质，它具有卓越的拉伸强度和分子组成，在肿瘤类器官3D培养过程中形成基质蛋白膜，模拟细胞外基质。
Q3：实验过程中不小心把Matrigel胶基质膜吸破了，会对细胞造成什么影响?
A3：实验过程中不小心把Matrigel胶基质膜吸破了，会对细胞造成什么影响?
Q4：是否能将类器官从一种基质转移到另一种基质？
A4：强烈建议将提取和扩增类器官的整个过程中使用同一种基质作为细胞培养的标准操作。
Q5:为什么Matrigel胶成胶不均匀？
A5:Matrigel胶对温度非常敏感，超过10℃即开始成胶，超过22℃成胶速度会更快。在操作过程中应注意，所有接触Matrigel胶的试剂耗材产品都需要预冷，操作过程应全程在冰上操作，确保低温环境。在其生长过程中，注意及时补液，避免Matrigel胶基质膜干裂。
Q6:肿瘤类器官培养多久可以进行传代？
A6:在显微镜下观察，选择类器官密度达500个/孔或单个类器官体积大于300uM时，进行传代，传代过程中应避免大量类器官的损失。应注意，当类器官没有生长到足够的量时，要耐心等待，坚持换液，不要急于传代。来自不同个体及不同癌种的类器官存在差异，对于一些对缺氧特别敏感的细胞，体积过大时球体内部会出现细胞坏死、凋亡而引起的空洞，一旦出现需要尽早传代。
